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紫外分光光度計測定葡萄糖的操作講解
發(fā)布日期：2017-05-15 瀏覽次數(shù)：8464
紫外分光光度計利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標樣的比較，還能進行定量分析。
葡萄糖是自然界分布廣且為重要的一種單糖，它是一種多羥基醛。水溶液旋光向右，故亦稱“右旋糖”。葡萄糖在生物學領域具有重要地位，是活細胞的能量來源和新陳代謝中間產物。植物可通過光合作用產生葡萄糖。在糖果制造業(yè)和醫(yī)藥領域有著廣泛應用。
紫外分光光度計如何快速測定葡萄糖呢？
一、材料、試劑：葡萄糖、糊精；葡萄糖氧化酶；草酸鈦鉀；麥芽糖；可溶性淀粉；0.9%氯化鈉注射液；所用試劑均為分析純；試驗所用水為二次蒸餾水。
二、儀器與設備：紫外分光光度計；電子分析天平。
三、試驗方法：
1、草酸鈦鉀溶液(0.0354 g/mL)的配制準確稱取0.0354 g草酸鈦鉀分析純置于1000μL的生理鹽水中，充分溶解，備用。
2、葡萄糖標準溶液(0.1 g/mL)的配制準確稱取0.1 g葡萄糖樣品置于1000μL的生理鹽水中，充分溶解，備用。
3、葡萄糖氧化酶標準溶液(100 U/250μL)的配制在裝有100 U/10μL葡萄糖氧化酶的離心管中，加入240μL的生理鹽水，混合均勻，備用。
4、樣品中葡萄糖的測定測試時，首先分別移取150μL葡萄糖氧化酶、75μL草酸鈦鉀、175μL緩沖溶液至2.5 mL的石英比色皿中，再移取100μL檢測試樣至比色皿中，立即置于紫外分光光度計中，測量其在波長382 nm的吸光值，通過吸光值與葡萄糖質量濃度間的響應關系得知樣品中葡萄糖的含量。
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